
原标题:大鼠CUMS郁闷症模型的制备及行为学点评
缓慢不行预见性轻度应激(chronic unpredictable mild stress, CUMS)是树立郁闷症模型的办法之一。郁闷症是一种严重危害人类身心健康的精神妨碍疾病,它极度影响了患者的日常工作和日子。
有多个方面数据显现,15%的郁闷症患者伴有自杀倾向,而且近60%的自杀逝世者罹患郁闷症或许其他品种的情感妨碍。
国际卫生组织宣布的(2001年国际卫生陈述》指出,郁闷症现在已成为国际第四大疾患,到2020年,郁闷症将成为开展中国家最重的疾病担负之一,重度郁闷会成为逝世和残疾的第二大原因。
郁闷症的成年患者临床上往往体现为情绪低落,爱好缺少,自我点评过低,不适当的愧疚、失望和自我仇视,有些患者还或许会呈现胃口削减、体重下降、注意力不会集、失眠、记忆力减退、社会活动削减、性欲下降等,严重者乃至自杀。
这些症状是缓慢的,但跟着时刻的推移,复发频率逐步添加,病况随每次复发而逐步加剧。尽管郁闷症的发病率逐年进步,然而其发病机制并不非常清楚,为探究其各种不知道要素,需求树立牢靠的动物模型。本节就大鼠 CUMS的造模办法做一扼要介绍。
一、试验动物的挑选及分组
挑选成年雄性Wistar大鼠100只,体重为200~250g,随机分红10组。其间一组正常养殖,自在饲用食物和水,作为对照组;其他9组给予缓慢不行预见性轻度应激。造模成功率90%。
二、造模办法
试验组大鼠单鼠单笼养殖,给予CUMS影响,对照组大鼠每5只一笼,正常喂食。
CUMS郁闷模型制造计划如下:
①笼子歪斜45°,7h;②距鼠尾1cm处,夹尾1min;③禁食,24h;④禁水,24h;⑤4℃冷水游水,5min;⑥是非倒置,24h;⑦200转/min水平摇晃,5min;⑧不同的噪声,6h;⑨放异物,12h;⑩湿润垫料,12h;⑩不给予任何影响,24h;⑩40℃热水游水,5min。
以上的12种影响随机安排到21d内,每日1种,每种影响不能呈现3次以上,同种影响不能接连呈现,使动物不能意料影响的发作。第22天对一切动物进行行为学点评:旷场试验、逼迫游水试验(forced-swimming test)和1%蔗糖水偏好试验(1% sucrose preference test,1%SPT)测定,处理前后若数据具有统计学差异(P<0.05),则阐明模型树立成功。
三、大鼠郁闷症模型的行为学测验点评
(一)1%蔗糖水偏好试验(1%SPT)测定
1%蔗糖水偏好等于1%蔗糖水消耗量(水消耗量+1%蔗糖水消耗量)。CUMS影响开端前,要对一切试验大鼠进行糖水习惯的练习,时刻约为4d,将2瓶糖水放在笼子上24h后。
其间一瓶糖水用纯水代替,再放置24h,然后再禁食禁水24h,最终单鼠单笼,每个笼子上放一瓶约75ml的纯水和一瓶约75ml的1%蔗糖水,供大鼠1h内自在饮用。习惯阶段结束后,进行21d的CUMS影响。
第22天禁水、禁食23h,第24小时测定动物1h饮用1%蔗糖水的量。测定前后水瓶的质量差为动物1h饮用1%蔗糖水的量。1%蔗糖水消耗量以1%蔗糖水消耗量与水和蔗糖消耗量之和的比进行鉴定。
每周测定1次,相对于对照组,该比值在模型大鼠组显着下降,阐明郁闷症组大鼠欣快感下降,这是郁闷症的中心体现之一(图18-1)。
(二)旷场试验(OFT)
办法:将动物放入100cm×100cm×50cm、周壁和箱底为黑色的箱内,且其底面由25块持平的20cm×20cm正方形组成,视频盯梢剖析软件(ANY-maze)体系主动区分。
将动物放入正中央格后开端测定,每次测定5min,测验进程选用摄像机记载,每只大鼠只进行一次行为测定,测定结束,粪便整理洁净后,用75%乙醇擦洗洁净箱底,再进行下一只测定,选用单盲法。
测定目标为5min内不运动时刻、攀爬次数(两只前爪脱离底面)、水平运动间隔(4只爪穿过格子数)。
(三)逼迫游水试验
逼迫游水试验(forced swimming test, FST)是以之前Porsoltetal树立的试验办法为根底。在此试验中大鼠被放在敞开的圆柱形白塑料容器内(直径40cm,高80cm),往容器内注入40cm的水,温度为22~25℃,记载处于该环境的大鼠在发生失望的不动状况进程中的一系列参数。
总记载时刻为5min,选用单盲法。测定目标为不动时刻(大鼠在水面漂浮只要细微的活动,或是身体垂直于水面只要鼻子显露水面的时刻)。相对于对照组,该值在模型大鼠组显着下降。
四、评论
本研讨能成功仿制大鼠CUMS模型。CUMS模型是树立郁闷症模型的办法之一,被认为是最挨近在日常日子中人们长时刻遇到的压力和波折后导致的郁闷症的动物模型。
在啮齿类动物中,CUMS郁闷症模型可以有用地引出郁闷样症状。如糖水偏心程度下降,被称为欣快感缺少,是郁闷症的中心症状之一。所以,CUMS模型被作为一个有用的动物模型而被大范围的使用于郁闷症的研讨。
行为学点评的试验大范围的使用在检测动物模型的有用性,包含1%糖水偏好试验(SPT)、旷场试验(OFT)、逼迫游水试验(FST)。近年来,CUMS动物模型得到了极大的开展,其效度及信度均得到了很好的进步,但仍不能彻底战胜假阳性和假阴性的问题。
本次试验共挑选动物100只,成功90只,成功率挨近90%。研讨中发现,现在作为该模型的备选影响方法多种多样,以下两点要引起注重:
①在影响的方法上,相同的或相似的影响不能接连两天呈现,不然大鼠或许会呈现耐受,而且每天的影响时刻也不要固定。
②在模型有用性点评上,要采纳单盲法,削减主观要素对其形成的影响。
来历:《神经疾病动物模型制备理论与技能》
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